品名:Trypsin-EDTA 2.5%,胰酶,不含酚红,10X
品牌:鑫泉科技(Sin-troch)
货号:XQ-CC0120
规格:100ml
【说明】
胰酶是(trypsin-EDTA)是最常用的细胞分离试剂,为223个氨基酸组成的单链多肽,是胰蛋白酶原(trypsinogen)在Lys6和Ile7 之间切除氨基N末端6肽(hexapeptide)得到的。名肽由6个二硫键交联,自然状态的胰酶被称为B一胁酶。B一胰酶自行水解(Lys131和Ser132之间)得到a一胰酶,仍然由二硫键交联。
胰酶属于丝氨酸水解酶家族,活化位点包括His46和 Ser183,胰酶裂解 lysine 的羧基末端和arginine 的氨基末端,水解效率在任何一端测存在酸性氨基酸时降低,而当proline 存在于裂解位点的羧基末端一侧时水解反应不能发生。
胰酌的最佳使用 pH 值在 7.2-9.2之间。
本产品为10倍浓缩型,含有2.5%胰酶和0.2g/L EDTA.4Na,不含酚红(phenolred)。使用时需要用不含钙和镁例子的 Hank's 平衡盐稀释为 1X。
【操作步骤】
注:使用前将肤酸解除冷冻,保存在4-8℃,建议不要重复冻溶
1移除细胞培养斯/皿中的培养液,用适量不含错和镁离子的PBS或DPBS快速冲洗细胞1-2 次,完全移除培养瓶/皿中的液体;
2.加入适量(250px 培养皿加入0.5 毫升)胰酶,转动培养瓶/皿让细胞和酶充分接触;
3.放置在 37℃培养箱中,时间根据不同细胞类型1-5分钟不等;
4.轻轻磕击培养瓶/皿,在倒置显微镜下观察,大多数细胞应该呈悬浮状态;
5.加入培养基,用移液管吹打5-10次,按照实验要求将细胞种植到新的培养瓶/皿中。
【注意事项】
·胰酶对细胞有损伤,应尽量缩短孵育时间
·如果细胞培养在不含血清的培养基中,胰酶消化完毕加入PBS,500xg离心10分钟,移除 PBS,将细胞重悬于所用的培养基中
【保存】
-20℃。
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